細(xì)胞免疫熒光步驟是什么

細(xì)胞免疫熒光步驟對(duì)大家來(lái)說(shuō)一定是很陌生的，他是一種抗原抗體反應(yīng)，好像對(duì)我們來(lái)說(shuō)他顯得很遙遠(yuǎn)的樣子，因?yàn)槲覀儾⒉涣私馑茏鍪裁矗ㄟ^(guò)這種技術(shù)可以讓我們對(duì)抗原或抗體的性質(zhì)、定位一次來(lái)分析出更多的數(shù)據(jù)。那么細(xì)胞免疫熒光步驟是什么呢？

步驟：

1. 細(xì)胞一定要貼在玻片上（最好可以放入24孔板），為后面照像打基礎(chǔ)。細(xì)胞密度適中，大約60-75%滿片即可，否則容易脫片。

2. 取出細(xì)胞后用4%多聚甲醛固定15分鐘，現(xiàn)用現(xiàn)配。（以下各步驟切毋使玻片干燥）

3. PBS沖洗

4. 0.1%Triton作用20分鐘

5. PBS沖洗

6. 10%正常血清封閉10分鐘

7. 加入一抗，4度孵育過(guò)夜（找個(gè)小瓶蓋將小玻片支起來(lái)，抗體就不容易溢出），還要記住“砸片”，就是抗體從較高處落到片子上，以分布均勻。抗體稀釋度1：60，較常用！

8. PBS沖洗4次，各5分鐘

9加入熒光二抗，室溫30分鐘?？贵w稀釋度1：400，較常用！

10. 同8。

11. 90%甘油封片。也很關(guān)鍵阿，多封幾次才有體會(huì)。

12. 避光保存，或到顯微鏡下觀察。

細(xì)胞免疫熒光，這對(duì)很多人來(lái)說(shuō)都是第一次聽(tīng)說(shuō)這個(gè)東西，也不知道他對(duì)我們會(huì)有什么好處與壞處，科學(xué)研究就是這樣子的，普通老百姓是不會(huì)明白其中的道理的，但是這些研究也是確實(shí)的在我們的生活中取得了成果，能夠讓大家過(guò)的更加舒適。